圓二色光譜(簡稱CD)是應(yīng)用最為廣泛的測定蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的方法，是研究稀溶液中蛋白質(zhì)構(gòu)象的一種快速、簡單、較準(zhǔn)確的方法。它可以在溶液狀態(tài)下測定，較接近其生理狀態(tài)。而且測定方法快速簡便，對構(gòu)象變化靈敏，所以它是目前研究蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的主要手段之一，并已廣泛應(yīng)用于蛋白質(zhì)的構(gòu)象研究中。
用于推斷非對稱分子的構(gòu)型和構(gòu)象的一種旋光光譜。光學(xué)活性物質(zhì)對組成平面偏振光的左旋和右旋圓偏振光的吸收系數(shù)(ε)是不相等的，εL≠εR，即具有圓二色性。如果以不同波長的平面偏振光的波長λ為橫坐標(biāo)，以吸收系數(shù)之差Δε=εL-εR為縱坐標(biāo)作圖，得到的圖譜即是圓二色光譜，簡稱CD。
如果某手性化合物在紫外可見區(qū)域有吸收，就可以得到具有特征的圓二色光譜。由于εL≠εR，透射光不再是平面偏振光，而是橢圓偏振光，摩爾橢圓度[θ]與Δε的關(guān)系為：[θ]=3300Δε。圓二色譜也可以摩爾橢圓度為縱坐標(biāo)，以波長為橫坐標(biāo)作圖。由于△ε有正值和負(fù)值之分，所以圓二色譜也有呈峰的正性圓二色譜和呈谷的負(fù)性圓二色譜。在紫外可見光區(qū)域測定圓二色譜與旋光譜，其目的是推斷有機化合物的構(gòu)型和構(gòu)象。
樣品要求
1. 樣品必須保持一定的純度不含光吸收的雜質(zhì)，溶劑必須在測定波長沒有吸收干擾;樣品能完全溶解在溶劑中, 形成均一透明的溶液。
2. 氮氣流量的控制
3. 緩沖液、溶劑要求與池子選擇：緩沖液和溶劑在配制溶液前要做單獨的檢查，看是否在測定波長范圍內(nèi)有吸收干擾，看是否形成沉淀和膠狀；在蛋白質(zhì)測量中，經(jīng)常選擇透明性極好的磷酸鹽作為緩沖體系。
4. 樣品濃度與池子選擇
樣品不同，測定的圓二色光譜范圍不同，對池子大小(光徑)的選擇和濃度的要求也不一樣。蛋白質(zhì)CD光譜測量一般在相對較稀的溶液中進行。
原理
圓二色光譜采用特性少高効率的28度入射角干涉儀、集光効率高的光學(xué)系、排除雙折射元件的反射光學(xué)系，高精度控制光軸，通過控制偽影和經(jīng)時變化使裝置始終保持佳狀態(tài)。圓二色光譜由適合VCD的演算法的DSP鎖定檢測功能、實現(xiàn)了信噪比的大幅度改善，通過使用只透過VCD光譜測量目標(biāo)吸收帶的窄帶濾光片，可以測得現(xiàn)有方法測不到的微小波峰。
根據(jù)圓二色光譜法的原理和測試要求設(shè)計制成的儀器稱為圓二色光譜儀。目前圓二色光譜法及其儀器已廣泛應(yīng)用于有機化學(xué)、生物化學(xué)、配位化學(xué)和藥物化學(xué)等領(lǐng)域,成為研究有機化合物的立體構(gòu)型的一個重要方法。
使用圓二色光譜相關(guān)儀器時需要注意以下幾點要求
1. 儀器發(fā)生故障時應(yīng)及時報告技術(shù)人員處理.儀器發(fā)生異?，F(xiàn)象時，馬上關(guān)閉電源，保護現(xiàn)場并及時上報。
2. 不亂按鍵盤，操作人員不得進入操作規(guī)程規(guī)定以外的任何程序，不得按規(guī)定以外的任何功能鍵.卸下火花臺板時要輕拿輕放，防止內(nèi)表面劃傷.取出火花室內(nèi)圓石英墊片和玻璃套管時務(wù)必謹(jǐn)慎小心，防止操作不當(dāng)致其破碎。
3. 壓樣品夾子要垂直，不得在未夾好樣品時按激發(fā)鍵，不得在激發(fā)時觸摸或抬起樣品夾.如果遇到激發(fā)時聲音很大，應(yīng)該按F3鍵停止，不允許直接抬起樣品夾，否則易造成電路板燒毀。
4. 激發(fā)樣品后在火花臺內(nèi)產(chǎn)生黑色沉積物可導(dǎo)致電極與火花臺之間短路，所以火花臺應(yīng)定期清理。
5. 非崗位人員不得隨便進入機房，機房內(nèi)禁止吸煙，吃食物。
6. 如果遇到突然斷電時，應(yīng)先關(guān)總，再將其它電源關(guān)閉，等到來電后，按規(guī)程條款進行開機操作。
1. 雙光源設(shè)計帶來無可比擬的信噪比，技術(shù)可升級,可使在測量固體樣品時消除固體樣品本身的誤差，同時采集紅外光譜和振動圓二色光譜。圓二色光譜數(shù)字信號處理,而無需鎖定或者電子濾波，獨立的紅外光源接口、PEM的恒溫對應(yīng)可以獲得沒有經(jīng)時變化的基線。
2. 采用特性少高効率的28度入射角干涉儀、集光効率高的光學(xué)系、排除雙折射元件的反射光學(xué)系，高精度控制光軸，通過控制偽影和經(jīng)時變化使裝置始終保持zui佳狀態(tài)。圓二色光譜由適合VCD的演算法的DSP鎖定檢測功能、實現(xiàn)了信噪比的大幅度改善，通過使用只透過VCD光譜測量目標(biāo)吸收帶的窄帶濾光片，可以測得現(xiàn)有方法測不到的微小波峰。
3. 光學(xué)系、樣品室、檢測器都可以進行吹掃、可不受大氣的影響穩(wěn)定測量，一機多功能，可檢測紫外吸收光譜,圓二色光譜,總熒光譜,光散色譜, 線二色譜及熒光各相異性譜。圓二色光譜主要用于手性光學(xué)活性物質(zhì)的研究?？捎糜谟袡C立體化學(xué)研究、光學(xué)活性物質(zhì)純度測試、藥物定量分析、天然有機化學(xué)、生物化學(xué)與宏觀大分子、金屬絡(luò)合物化學(xué)、聚合物化學(xué)、蛋白質(zhì)折疊研究、蛋白質(zhì)構(gòu)象研究、物理化學(xué)等。
4. 橫電磁波，是一種在各個方向上振動的射線。其電場矢量E 與磁場矢量H 相互垂直，且與光波傳播方向垂直。由于產(chǎn)生感光作用的主要是電場矢量，一般就將電場矢量作為光波的振動矢量。光波電場矢量與傳播方向所組成的平面稱為光波的振動面。若此振動面不隨時間變化，這束光就稱為平面偏振光，其振動面即稱為偏振面。
5. 平面偏振光可分解為振幅、頻率相同，旋轉(zhuǎn)方向相反的兩圓偏振光。其中電矢量以順時針方向旋轉(zhuǎn)的稱為右旋圓偏振光，其中以逆時針方向旋轉(zhuǎn)的稱為左旋圓偏振光。兩束振幅、頻率相同，旋轉(zhuǎn)方向相反的偏振光也能夠合成為1束平面偏振光。如果兩束偏振光的振幅(強度) 不相同,則合成的將是1束橢圓偏振光。
